健児 村田
組織からのタンパク質抽出
ACLからのタンパク質の抽出
利用する試薬
・T-PER Mammalian Protein Extraction ReagentまたはLIPA buffer
・Thermo Scientific Halt Protease Inhibitor Cocktail, EDTA-Free (Product No.
87785)
カクテルを作成する:M-PERにInhibitor Cocktail, EDTA-Free x100を混合する
1. 1.5mlチューブにカクテルを500μlずつサンプル数分入れておく
2. サンプル採取し、1.5mlチューブに入れる
3. ホモジナイズ(できれば、電動のホモジナイザーを推奨)
4. 1.5mlチューブを4度で約14,000×gで5分間遠心し、ホモジナイズした遺骸靭帯を沈殿
5. 沈殿物を採取しないよう注意深く上清を採取する
適切な濃度にして保管する